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切片

   作者:管理   發布時間:2022-08-19 11:52:18

1)石蠟切片

石蠟切片(paraffin section)組織學常規制片技術中最為廣泛應用的方法。石蠟切片不僅用于觀察正常細胞組織的形態結構,也是病理學和法醫學等學科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態變化的主要方法,而且也已相當廣泛地用于其他許多學科領域的研究中。教學中,光鏡下觀察切片標本多數是石蠟切片法制備的。活的細胞或組織多為無色透明,各種組織間和細胞內各種結構之間均缺乏反差,在一般光鏡下不易清楚區別出;組織離開機體后很快就會死亡和產生組織腐敗,失去原有正常結構,因此,組織要經固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細胞組織死亡,而能清晰辨認其形態結構。

實驗流程:

 樣本接收:組織蠟塊。

 實驗步驟:將修整好的蠟塊置于石蠟切片機切片,厚3-4 μm。切片漂浮于攤片機40 ℃ 溫水上將組織展平,載玻片將組織撈起,60 ℃烘箱內烤片。水烤干蠟烤化后取出常溫保存備用。

 實驗結果:切好的玻片。

2)冰凍切片

冰凍切片(frozen section)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然后進行切片的方法。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡便,且不經過酒精、二甲苯等有機溶劑及高溫環境。可較好的保存脂類,酶類等易于溶解有機溶劑的物質。對切片厚度的要求也可以更好的滿足。

主要應用:

 切片后常規的HEIHCIF染色等。

 某些酶的顯示如ATP酶,β-半乳糖苷酶等。

 組織中的脂肪和脂類物質,這常見于某些病例如脂肪瘤、脂肪肝等。切片后,經過油紅O染色輔助判斷。

 神經病理學技術中,要求一定厚度的腦組織切片等。

 對某些物質所進行的免疫熒光的研究,比如新鮮組織自發熒光,切片后觀察。

實驗流程:

 樣本接收:干冰保存運輸的新鮮組織或者常溫固定液保存的組織。

 實驗步驟:新鮮組織取材并OCT包埋/固定組織經過15%-30%梯度蔗糖溶液脫水后取材并OCT包埋,然后按指定要求切片。

 實驗結果:低溫存放的完成的切片。


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